蛋白质的测定是评价粮食品质的重要指标之一,测定常采用GB5009.5-2016《食品安全国家标准食品中蛋白质的测定》中的凯氏定氮法和自动凯氏定氮仪法。凯氏定氮法测量准确度高,是测定蛋白质的经典方法,但操作繁琐,费时或费力,而自动凯氏定氮仪法省时省力,准确度和精密度高。下面对两种实验方法作进行具体比较。
1 试剂和仪器
1.1 试剂
硫酸铜(CuSO4·5H2O);硫酸钾(K2SO4);硫酸(H2SO4);硼酸溶液(20 g/L);氢氧化钠溶液(400 g/L);硫酸标准滴定溶液[c(1/2H2SO4)=0.050 0 mol/L]或盐酸标准溶液[c(HCl)=0.050 0 mol/L];混合指示剂:2份甲基红乙醇溶液(1 g/L)与1份亚甲基蓝乙醇溶液(1 g/L)临用时混合。
1.2 仪器
KjeltecTM8400型全自动凯氏定氮仪、定氮蒸馏装置、天平(感量1 mg)。
2 分析步骤
2.1 凯氏定氮法
试样处理、测定和结果计算均按GB5009.5—2016标准进行操作。
2.2 自动凯氏定氮仪法
2.2.1 试样处理
称取粉碎后的试样0.2～2 g,精确至0.001 g,移入干燥的100 mL试管中,加入0.8 g硫酸铜、7 g硫酸钾及15～20 mL硫酸,置于试管架上放置过夜,将试管放置于消解炉上,盖上密封盖,打开冷凝水,打开消解炉开关,设定消解温度420℃,消解时间2 h,消解完成后取下冷却,同时做试剂空白试验。
2.2.2 测定
开机预热完成后,在控制面板中编辑好所需要的程序,输入当前测定所用标准溶液浓度,添加所要分析的样品,将消解完成的试样上机测定。
2.2.3 结果计算
测定结束后,仪器自动计算并打印结果。
3 结果与讨论
采用上述两种方法测定6份小麦样品中的蛋白质含量分析比校,见表1。
测定结果表明,自动凯氏定氮仪法的相对标准偏差比凯氏定氮法小,自动凯氏定氮仪法的精密度明显比凯氏定氮法好。自动凯氏定氮仪法的回收率比凯氏定氮法大,准确度较高。
表1 凯氏定氮法和全自动凯氏定氮仪法测定6份小麦样品中的蛋白质含量
4 结语
全自动凯氏定氮仪法是在化学分析的基础上的改进,测定原理和凯氏定氮法相同,具有操作简便、快速、准确度高、精密度好等特点。全自动凯氏定氮仪采用了自动化控制技术,整个抽提萃取测定计算过程,无需人工看守,这样既减少了人体的一些不必要的伤害,同时也提高了工作效率,可以实现定氮过程的高效、准确和简便。从上述对比测定结果可以看出,全自动凯氏定氮仪法测定粮食中蛋白质含量,结果令人满意,适宜在粮食检测行业中大力推广使用。
发布时间：2025-12-11 
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